多孔玻璃漏斗過濾的應用-生物分析圖像顯微鏡
對預定反應時限(首次為15秒到2分鐘)的樣品在多孔玻璃漏斗中加入發
煙硝酸(緩慢加入,以測其反應)。如反應時間長,可采用其它試劑,如濃
硝酸、Schulze試劑(次氯酸鉀酸和不等量的硝酸的飽和水溶液)和次氯酸鈉
(漂白)。主要目的是將部分降解有機物轉變為腐殖酸。通過多孔玻璃漏斗
過濾,去酸,并用大量蒸餾水沖洗至中性以中止其反應。
為了中和氧化處理產生的腐殖酸,尤其是當殘留物中含有大量的木材
物質時,可能要使用5%氨水(通常只要1—2分鐘)對殘留物大致清洗一下。
這個過程同樣可以在多孔玻璃漏斗中進行。
進行超聲波振動(50kHz)處理時,要將含水殘留物從多孔玻璃漏斗轉移
到聚丙烯燒杯中,再對其進行超聲波浴,第一次時間不得超過2分鐘。然后
,將殘留物再次移到多孔玻璃漏斗中,用水沖洗,除去所有細(<8弘m)顆粒
。
第二次制片的方法與第一次相同(步驟8)。檢查標本及效果之后,可以
根據需要進行氧化、超聲波振動或其它進一步的處理。其中包括用尼龍或
聚脂篩布過篩,除去所有多余的碎粒(如<10弘m,<20弘m,>150弘m),和/
或淘洗或短時間離心,以除去大而重的顆粒。淘洗殘留物可放在一個大的
盛水的表面皿中,較重和較輕的顆粒被分開,并將較輕的顆粒吸出。由于
不同比重的顆粒具有不同沉淀速率,通過短時間離心可將大部分浮在面上
較輕的顆粒倒出或吸出。
一旦制成所需數量的薄片,剩下的殘留物要保存下來。把這些殘留物
轉移到具標簽的小瓶中,加水使之沉淀。接著用吸管吸出多余的水,然后
向小瓶中加入甘油(甘油溶劑)和幾滴飽和酚溶液(后者用來防止微生物活動
和真菌滋生),并封存好。