大多數土壤中都可以找到鏈霉菌噬菌體
大多數土壤中都可以找到鏈霉菌噬菌體。這些噬菌體可利用
常規的雙層平板技術,通過將土壤浸提物直接涂布到含有指示菌
平板上加以分離3也可在液體培養基中先用土壤浸提物侵染指示菌
,使噬菌體得到增殖,然后再涂平板分離。直接涂平板時,平板
中形成的每個噬菌斑代表土壤樣品中一個噬菌體粒子。有些噬菌
斑經過特殊增殖以后才可檢測到,甚至有些土壤樣品經直接涂布
不能出現的噬菌斑也可經增殖后檢測到。
鏈霉菌菌株和噬菌體的貯存
短期使用的菌株可以瓊脂培養物的方式(斜面或密封的培養m1
)在4℃保存。如果產生孢子后再冷藏的話,培養物可存活很久(好
幾個月)。未產生孢子的培養物需要經常轉接。
長期保存菌種最方便的方法是用20%的甘油制備孢子懸液,
于一20℃保存.取樣時即使反復解凍和再凍,只要孢子再次冷凍
前不放在室溫下太久,活力幾乎也不會下降。如果要長期貯存,
以作為冷凍孢子懸液的后備貯存物,通常按下法(Hopwood和Ferg~
son,1969)制備真空干燥樣品(于濾紙芯上)。
噬菌體通常用DNB制成懸液,置于4℃下避光保存。噬菌體的
真空干燥樣品可用濾紙芯蘸懸液后按處理孢子的同樣方法制淆。
真空干燥樣品的制備