細胞光散射樣品的制備細胞儀測定檢測顯微鏡
樣品的制備
流式細胞儀是測定一個或重復的每個顆粒流經光路的信號。因此，
細胞必須做成單個懸浮狀態，不能聚集，且如前部分所述，也不允許有
細胞碎片存在。
非染色細胞的光散射
一個粒子如細胞出現在一束光線中，立即會干擾該光束，造成該光
束入射光的重分布。該細胞所獲能量則以衍射、折射、反射等復雜的參
數形式重新發射出來。這些參數與細胞體積、表面構象、內部結構成函
數關系。市售的流式細胞儀一般只測定兩個固定位置的光散射，即低角
前面約10°的光散射及90°的光散射。
一般認為，90°位置的光散射值主要受細胞內部結構所致的光反射
和折射影響，而低角前向(10°)位置的光散射則主要代表細胞大小
流式細胞儀有一整套儀器系統，適用于各種特殊條件下的測試，原
理大同小異。區別僅限于激發光源，光倍增管的敏感性及配置的計算機
不同。
把低功率激光器發出的相干光(Coherentlight)以一條狹窄的光束
聚焦在流動的細胞上，這樣可輕而易舉地提高分辨率。但要提高敏感性
則必須依賴造價昂貴的大功率激光器才能實現。同時大功率激光器需要
極高功率電源(如多線18W輸出功率的氬激光器，每小時耗50KW，即使普
通4W輸出功率的激光器，每小時亦耗電12KW之多)。例如小量膜受體免
疫熒光檢測，以及需要紫外激發時，均需要高功率的激發光源。氬氪激
光器效率均較低。再者，若希望儀器系統帶有可測寬譜帶的染料激光器
時，則需配置大功率電源，這樣，儀器本身造價也要大大增加。這里需
要補充的是，相對上述那些不利因素而言，如果使用PI染色法檢測脊椎
動物細胞內DNA的含量，只需100mW的低能激光器。
