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培養液中細胞葡萄糖代謝實驗觀察倒置顯微鏡




來源:yiyi
時間:2018-1-30 0:23:29

培養液中細胞葡萄糖代謝實驗觀察倒置顯微鏡

    增加了培養液中碳酸氫鈉弱解離作用從而產生過剩的H+降低培
養液pH。因此在密閉培養時需要大的上方空間,其體積要比培養液
大10倍,這個體積對供給足夠的氧氣也是需要的。這種一般的上方
空間對于大規模培養或連續流動空氣的開放系統是不可能的,故后
者要求通過1個濾器供氣并通過另1個濾器抽氣。

    細胞進行葡萄糖代謝其結果是累積丙酮酸和乳酸鹽。葡萄糖代
謝比細胞要求要快,因此培養液中理想的葡萄糖濃度是2g幾以下,
在培養中補充葡萄糖比一開始增加葡萄糖的濃度更好一些,用半乳
糖或果糖代替葡萄糖是一種改良,因可明顯減少乳酸的形成,但也
同時帶來生長率緩慢的結果。這些防止非生理學的pH作用對小量培
養是成功的。當培養規模擴大時,培養上方空間及培養表面面積與
培養液容量的比例將減少。同時,為了增加細胞貼壁的表面面積及
增加單位體積的細胞密度開發了很多系統。

    pH控制系統的基本原理是一個經高壓滅菌的pH檢測探頭,將信
號輸入pH控制器,然后換成數字或類似的pH顯示。這是一種pH監測
系統。要求按規定控制pH值的高低,pH不能超出這個范圍。pH值調
整板上的這兩個高或低規定點接轉到1個能起動泵或螺線管活塞的
中繼器上,這些裝置將加入酸或堿使培養系統pH調整至規定的范圍
內。一旦培養液與上方空間相平衡后,它是很少見到pH上升到規定
點之上,因而加入酸是忽略不計的,如果加入堿則推薦使用碳酸氫
鈉(5.5%)、氫氧化鈉(o.2mol幾)只能用在快速攪拌率的培養系
統,因為局部濃堿在被稀釋之前可損害細胞。

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