動物細胞培養器材和生長-倒置顯微鏡的應用
培養容器和生長表面
為動物細胞生長不會丟棄的標準材料是玻璃,雖然在較大規模
培養中玻璃可以用不銹鋼代替。使用硅硼酸鹽玻璃材料仍是更為可
取,因為它與鈉玻璃相比沒有堿性,而且耐操作,高壓滅菌較好。
玻璃器皿的基本要求是完全洗凈后,要用雙蒸水沖洗3次。細胞可
迅速在玻璃基質上貼壁。如果需要,為細胞的貼壁生長可增加各種
培養表面的處理。在懸浮培養中要阻止細胞貼壁,必需用硅制劑專
利藥物處理。
要使用不銹鋼構成的復雜系統及硅管與各種系統的組成部分相
連。硅管是很易透氣的,因此當轉移溶養液時會丟失C02而產生了
問·題。硅管在使用蠕動泵時,也容易迅速磨損。因此,應該使用
附加的結實的厚壁管子。當接連硅管與不銹鋼管子時,要用塑料繩
捆住穩固好以防止在高壓或使用培養系統時,由于回流壓力的增加
而脫開。不銹鋼管末端要加上硅管頂端以防止擦碰培養容器或引起
細胞的機械損傷。習慣用的連接器,通常在操作過程中,應該保證
與附件容器能很好地無菌結合(來自所有發酵器供應公司的連接器
都是可利用的)。 ·
經常間隔安全取出培養物是很重要的。進口處加一個疫苗瓶塞
,提供插入一個皮下注射器取樣是一千簡單的辦法,但這只適合小
量培養,而且反復刺入疫苗瓶塞會導致整個培養物丟失。因此推薦
使用發酵器公司供應的專門取樣裝置是有效的。這些取樣裝置能自
動清除管道內含有死細胞的靜止培養液,因而無需丟棄較初取出的
少量樣品而增加保持無菌的機會。