細胞的定量測定圖像分析軟件-倒置圖像顯微鏡
為細胞生長而維持正確的生理學條件的方法有關,而不是主要
改變培養容器的設計。單層細胞培養系統(貼壁依賴細胞)在單位系
統中大規模的培養是很困難的,但與多次重復操作不同,現在已經
發展了廣泛的各種培養系統。其目的是增加為細胞可利用的表面面
積,此面積與培養液和成功到達總培養的體積有關。
細胞培養更為綜合的方面是首先要先討論的,這樣才更能理解
這些技術操作方法。
一般方法和培養參數
熟悉某些生物學概念和方法是著手大規模細胞培養的基礎。在
小規模培養中,經常存在偏差導致某些錯誤。如果培養失敗是掃興
的,但不一定會在時間和用費上造成大損失。在大規模細胞培養中
,由于培養范圍擴大也就表示投資者人力物力的更大增加。培養失
敗就會相當嚴重,而同時培養系統會進一步要求更嚴格地遵守所有
的條件。在這一部分是討論整個·大規模細胞培養系統的基本要素
,如果培養容量還要增大,或培養的設計和操作要改變時,必需要
注意上述要素。
細胞的定量測定
測定細胞總數(用血細胞計數器計數整個細胞數或染色細胞核
數),以及細胞總量(檢測細胞蛋白質總量或干重),都是容易做到
的。但測定細胞活性比較困難,因為所使用的方法是用對細胞產生
應激反應來測定一個特異而非經典的細胞生理學參數。另外的困難
是很多培養系統不能取到細胞樣品(大多數屬貼壁依賴細胞),或不
能用肉眼檢查,因而必需進行非直接的測定。