疫熒光法切片的顯微鏡觀察標本結構清晰度
(1)甘油:甘油(glycerin)作為封固劑多用于運動終板、脂肪
、類脂質等標本的封片,既可以采用稀釋的甘油封片,也可以使用
純甘油封片。純甘油除了可對標本封片外,同時還具有對標本的防
腐作用,因為甘油本身具有吸水性。由于甘油的折光率(1.473)低
于組織標本的折光率(1.53~1.54),所以封固后的組織細胞在光
鏡下觀察時,其清晰度不是很好。因此,甘油封片的組織切片通常
是在低倍光鏡下觀察的。
(2)液狀石蠟:液狀石蠟(1iquid paraffin,石蠟油paraffino
il)是石油化工的一個產品,其內雜質含量較少,折光率為1.471
,多數情況下使用在整體標本的封固方面。另外,由于液狀石蠟很
少引起非特異性熒光反應,因此也用于免疫熒光法切片的封固。
(3)新型水溶性封固劑:一種人工合成的新型封固劑,其較大
的特點是:封固時不需要蓋玻片,封固劑為水溶性的液體,但封固
后則在標本表面凝固為透明薄膜,如ClearmountTM。適用于石蠟切
片、冰凍切片以及不能進行乙醇脫水的組織染色。
2.固體封固劑 甘油一明膠(glycerin-jelly)為固體封固劑
,現在已不常使用了,某些實驗室會在脂肪染色、組織化學的某些
酶類染色以及部分免疫組化染色后使用。甘油一明膠的折光率較純
甘油的折光率要高一些,因此光鏡下標本結構的清晰度也有所提高
。與其他水溶性封固劑不同的是其封固后具有一定的凝固性,這是
由于明膠的熔點(約65~70℃)要高于室溫的緣故。
也小,只是封固切片的凝結時間要相對延長,一般需要3~6個月,
但凝結后的切片堅硬牢固,不怕磨損。隨著時間的推移,切片內樹
膠氧化(日光、燈光照射)逐漸變成黃色,同時也伴隨組織顏色的
減退。