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光學顯微鏡細胞形態的圖像質量定量分析實驗




來源:yiyi
時間:2018-1-26 22:35:56

光學顯微鏡細胞形態的圖像質量定量分析實驗


   組織切片制作方法
    組織切片制作方法與非切片制作方法的較大區別是利用切片機
制作出相應的標本切片。制作的切片包括:石蠟切片、火棉膠切片
、冰凍切片、樹脂切片、碳蠟切片、電鏡超薄切片等。
    切片類型的確定主要是依據標本內支持物的種類,如石蠟切片
,其標本內的支持物為石蠟,石蠟填充于標本內的各個空間。因此
,石蠟切片實際上就是切帶有標本材料的石蠟,因為標本與石蠟已
經融為了一個整體。同理,冰凍切片的支持物是冰,電鏡超薄切片
的支持物就是環氧樹脂。目前,較常用的切片種類是石蠟切片、冰
凍切片、樹脂切片、電鏡超薄切片。

石蠟切片制作過程總體上可概括為9個步驟:取材、固定、脫水、
透明、浸蠟、包埋、切片、染色、封固。制作過程中的每個環節都
是相互關聯的,一個環節出了差錯,必將會對后續環節的操作產生
負面影響,并有可能較終導致光鏡下組織或細胞形態結構觀察的偏
差或失敗。
    取材是指從人體或實驗動物體內取下所需觀察的組織材料的過
程。
    標本主要來源于臨床活體檢查、臨床手術切除、實驗動物模型
以及病理解剖等途徑。取材的標本要求均為新鮮組織。離體或機體
死亡大于兩小時以上的標本材料,其內部可能會出現不同程度的自
溶,嚴重者甚至會出現細胞的彌散與溶解現象。因此,標本的取材
是標本樣品制備過程的第一步,取材是否科學、是否符合實驗要求
,將直接關系到光鏡下組織細胞形態的觀察質量。
    做好標本取材前的各項準備工作是保障取材過程順利進行的前
提。取材過程中所使用的各種器械(解剖剪、手術刀片等)是否鋒利
,固定劑的配制與固定容器的選擇是否恰當,以及其他輔助性的取
材用具(卡片紙、軟木片等)的準備是否充分等,都會直接影響標本
取材的過程。另外,實驗動物處死方法的選用要恰當,避免動物瀕
臨死亡前的過度掙扎,否則會引起機體內缺氧時間過長而導致組織
或細胞結構的失常。
    總之,無論怎樣實施標本取材的操作過程,其較終的要求就是
整個取材的過程應迅速、準確。

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