制備洋蔥內表皮切片細胞分析圖像顯微鏡廠商
制備洋蔥內表皮切片。在兩個染色盤中分別盛入上述兩種中性紅溶液
。再準備兩個盤盛相應的沖洗液。將數個切片轉入每種染色溶液中,并使
之漂浮在液面上。10-20分鐘后,將表皮切片轉到pH相同的沖洗液盤內,靜
置30秒鐘,輕輕震蕩,最后將一小滴沖洗液加到載玻片上,蓋上蓋玻片并
在顯微鏡下觀察。為避免表皮在蓋玻片下長時問擠壓,應立即進行觀察。
為了清楚區分細胞的哪種成分染了色,可以用1.OM的蔗糖(或其它榴似滲
透勢的溶液)將表皮切片質壁分離,以便使原生質膜與細胞
在酸性條件下,中性紅只能使細胞壁染色。在堿性溶液中,只有液泡
著色,而且一些細胞會發生液泡收縮。往往是靠近表皮切片邊緣的細胞染
色較重。這可能表明在表皮切片制備過程中發生了一些變化或是表皮切片
邊緣與染色劑接觸較多使染色加重。染色后的細胞壁和液泡呈暗磚紅色。
將表皮切片從較酸溶液中轉入堿性緩沖液會使染色位點由細胞壁轉向
細胞液泡,反之,則情況相反。
最近強調膜蛋白的重要性致使對膜脂的功能有些估計過低了。然而早
已證明,膜蛋白在脂類不存在時不能行使其真正的功能。膜類脂參與對細
胞生活極其重要的三種物質(水、氧、二氧化碳)運輸的事實證明,膜脂對
細胞運輸十分重要。水、氧和二氧化碳都是通過膜脂區域被動運輸的。而
且,細胞膜的滲透特性(這對植物細胞是十分必要的)也是由膜的這些脂類
成分造成的。
除獲取構成細胞膜類脂種類的較多資料外,期望通過透性測定來更清
楚地了解滲透過程。并且,這些結果亦有助于定量確定滲透劑與膜分子的
相互作用力。用良好控制而又不復雜的人工磷脂膜和復制膜進行平行試驗
,也將有助于解釋細胞膜試驗資料。
很大潛力的研究領域是對植物細胞進行透性比較研究。測定那些適應
于極端環境條件(如干早、霜、熱)下的特殊植物細胞類型的透性值將能揭
示細胞透性變異盤{『量值,從而得出關于膜脂組成功能的重要結論。
最后,對因外界或內部因子而發生了變化的細胞膜進行透性測定,將
會促進我們對滲透過程的了解,以及允許我們解釋所伴隨的膜結構和膜組
成的變化。此種詹息除了在了解滲透過程方面具有價值外,在病理學、藥
理學、毒理學等方面以及對了解植物細胞吸收除草劑等,都具有”卜分重
要的實踐意義。
上述論題僅是一些期望能由將來膜透性研究所亟待解決的論題。還有
一些方面尚未提到,如脂類組成對主動運輸系統功能的影響,磷脂分子在
膜內的流動性問題,膜內脂與蛋白相互作用問題等。
盡管我們對細胞膜的認識有了很大進展,但是,仍有許多重要問題至
今尚未解決。所有這些都等待著后來人花更大的努力去研究。