生物發光法測量樣品中ATP含量測量微生物數量
流式細胞術
流式細胞術可快速對一個細胞群體進行鑒定,這種鑒定基于一些參 數,如細胞形態、核酸含量和表面抗原等。細胞用適當的熒光素標記后 制成單細胞懸液,并逐個快速通過通道,同時用激光束進行檢測。通過 分析每個細胞同激光束的相互作用(散射光和熒光),便可獲得群體中符 合預期參數的代表性菌體細胞。流式細胞術中,熒光標記的抗體可被用 來直接檢測菌體細胞。在食品微生物學中,其中一個缺點是這種方法無 法區分細胞死活以及來自于食品基質的干擾。
生物發光法
生物發光法通過測量樣品中ATP含量來間接測量微生物的數量。由 于只有活細胞中含有ATP,那么ATP的數量直接與樣品中微生物數量相關 。在mg2+存在時,用熒光素一熒光素酶系統(來自螢火蟲)可以測量所檢 樣品中裂解細胞的ATP濃度。這種方法可以檢測每克或每毫升食品中低 達10的2次方~10的3次方的活細菌細胞或10個酵母細胞,其也能測量設 備表面的微生物數量。這種方法非常迅速,并且使用這些方法的自動系 統現在也已經出現在市場。
在另一種方法,來自于自發光的細菌(如弧菌)中編碼生物發光的基 因(Z眥基因)已經克隆到一些致病菌、指示菌以及腐敗菌中。熒光素酶 催化分子氧氧化黃素單核苷酸(FMNH2)和長鏈脂醛并且發光。因為只有 活細胞可以發光,克隆有發光基因的菌株可以被用來快速評價殺死細胞 或從食品及食品環境中清除細菌的一些殺菌或除菌方法的有效性及其效 果。這種方法也被用來檢測受傷不能發光、但修復損傷后仍可發光的菌 體,F已經有商業生產的測量反應光強的自動系統。
許多其他的快速方法、自動系統以及傳統方法模型現在也都已商業 化。一些已經在文獻中經過詳細討論并且可以被查閱。 |