食品微生物分析圖像顯微鏡-微生物檢測儀器
食品中微生物分離的定性方法
這種方法的主要目的是確定樣品中是否含有特定病原體的活細胞或
芽胞。在必要時,食品中多種病原體通過特定的分離程序被檢測,如沙
門菌、大腸桿菌0157:H7、單核增生李斯特菌、霍亂弧菌和志賀菌。對
于另一些病原體,如腸致病性大腸桿菌、小腸結腸炎耶爾森菌和空腸彎
曲桿菌,一般不需分離程序,而使用的是計數方法。
分離程序一般包含幾個步驟,如非選擇性預富集,緊接著選擇性富
集,然后在含選擇性和鑒別性試劑的瓊脂培養基上檢測。假定當與相關
聯的微生物相比較時,食品通常包含低數量的病原菌,并且病原菌還可
能處于受損傷狀態。食品樣品(如25mL)首先在非選擇性的培養液中(225
mL)預富集培養一段時間,使受損細胞得以修復,繼而使其增殖以達到
中等數量(與其他許多相關微生物一起)。將部分預富集培養液接種至選
擇性富集培養液中進行培養。在培養期間,特定的病原體和有親緣關系
的微生物被認為將選擇性生長并達到較高的數量,同時許多其他微生物
不會生長。取少量的富集培養液(約0.01 mL)劃線接種到選擇性鑒別
瓊脂培養基表面,然后在特定溫度下培養一定時間,直到形成菌落。根
據不同的菌落特性,能夠初步檢測到病原體的存在。
它一般被認為是一個假設性檢測。為進一步證實試驗結果,對特征
性菌落的菌體進行純化并使用推薦的方法對其生化反應性、與特異性抗
體的血清學反應特征、免疫色譜側流試驗或聚合酶鏈式反應(PCR,后文
論述)等進行鑒定。常規的分離病原體方法可能要花10~12d時間,這取
決于特定的微生物種類。