用熒光顯微鏡或工業相機或熒光分光度計檢測熒光
免疫熒光試驗
大體上說，免疫熒光(IF)分析和ELISA很相似。在免疫熒光法下，
熒光物質標記的檢測抗體(抗菌體抗原或抗鞭毛抗原)在同抗原結合成免
疫復合物后會發射熒光，，通過在載玻片或96孔聚苯乙烯微孔板上，利
用熒光顯微鏡或工業相機或熒光分光度計檢測熒光。采用的熒光標記物
有羅丹明B、異氰酸熒光素以及異硫氰酸熒光素。熒光抗體技術通過兩
種基本方法進行：在直接法中，抗原直接與熒光標記的特異性抗體進行
反應；在問接法中，一抗不用熒光標記，但是具有種屬特異性的二抗一
k偶聯熒光素分子。在問接法中，熒光標記的抗體可以檢測一抗與抗原
形成的免疫復合物的存在。這樣，間接法消除了必須為每一種待檢微生
物制作熒光標記抗體的麻煩。
側流免疫層析法
側流免疫層析分析(試紙條分析)是一種夾心分析技術，與ELlSA反
應發生在微量滴定板的小孔中不同，側流免疫層析法是在膜上進行的。
首先，將捕獲抗體同定于膜(預先劃定)的一個區域上，用膠體金或乳膠
顆粒預先標記的檢測抗體也包埋在硝酸纖維素膜試紙條上；將含有特異
性抗原(微生物)的樣品加到樣品孔中，并與試紙條上檢測抗體相結合，
該免疫復合物依靠毛細虹吸作用向多孔膜的另一端遷移，在試紙條上有
兩條捕獲帶，一條特異性捕獲病原菌，另一條特異性捕獲沒有與抗原結
合的游離抗體(對照線)。如果膜上只有一條捕獲帶顯色(對照線)，意味
著這是一個陰性樣品；如果兩條帶或線都顯色，說明結果呈陽性。側流
分析技術在5～lOmin內可以得到結果，簡便易行，經濟節約，適用于初
篩試驗。
