菌種生長特征-酵母菌種涂布培養基分析顯微鏡
鑒定與確認
對于通過富集或直接涂布于低pH培養基上而形成的菌落必須用合適
的分析技術來確認其是否為脂環酸芽孢桿菌。采用何種合適分析技術是
主要的爭論點。對于確定所分離的菌種是酵母還是其他脂環酸芽孢桿菌
,以及對于確定該分離菌是否為革蘭陽性芽孢菌,進行鏡檢是必需的。
分離菌落是否產芽孢可能要進一步在其他培養基上涂布培養后,再進行
芽孢染色,然后鏡檢來進行確定。
起確認作用的菌種生長特性包括:在較高溫度(45~55℃)下能在低
pH培養基中生長,同時不能在中性pH培養基如常規平板計數瓊脂培養基
或未酸化基礎培養基上生長,也不能在低溫下生長。還有一種可行實驗
方案是將可疑菌落分別劃線于低pH和中性pH兩組平板上,然后將一組平
板置于45—50℃下培養,將另一組平板置于20—25℃下培養適當時間。
如果在低pH瓊脂培養基中在45℃下能生長,在25't2時在低pH瓊脂培養
基上少量或不生長,同時在其他平板上任意溫度下均不能生長,那么該
菌可能是脂環酸芽孢桿菌。較終確認還需進一步的檢測。
樣品經稀釋后進行熱休克處理并在40~55℃下培養3~7d,如不能
迅速進行熱休克處理或處理不充分應加入某種酵母/霉菌抑制劑。培養
結束時,將樣品在合適培養基上劃線并在無氧條件45~50℃下培養數天
。若有菌落形成可說明可能有脂環酸芽孢桿菌存在,盡管還需進一步分
析來進行確認。