熒光顯微鏡用紫外線照射激發分子-光學儀器
相差顯微鏡
許多染料都會殺死微生物,因而多數微生物活體無法進行染色
觀察。不經染色就觀察活菌體則需要采用相差顯微鏡(Phase-contr
ast microscopy)技術。相差顯微鏡用特殊的聚光器和物鏡來強化
生物不同結構的折射率差異。光通過具有不同折射率的物體時會減
速并發生衍射。不同介質中光速的差異就會導致亮度的不同。諾爾
馬斯基(微分干涉差)顯微鏡
和相差顯微鏡一樣,諾爾馬斯基顯微鏡(Nomarskimicroscopy)
也是利用折射率的差異來觀察未染色細胞及其結構。但微分干涉差
顯微鏡的分辨率比標準相差顯微鏡更高。由于景深(始終處于焦距
的標本厚度)很小,它能產生近乎三維的圖像。
熒光顯微鏡
熒光顯微鏡(Fluorescence microscopy)利用紫外線照射激發
分子,使其釋放出波長比入射光更長的光。不同波長的光呈現出不
同亮度的橙色,黃色或黃綠色。有些微生物,如假單胞菌(Pseudo
一17zonas),受紫外線照射時會自然發出熒光。而另外一些微生物
,如結核分支桿菌(Mycobacterium tuberculosis)和蒼白密螺旋體
(Treponema pallidum,梅毒病原菌),必須經發熒光的染料即熒光
染料(fluorochrome)處理后,它們才能在黑色背景下突現出來。吖
啶橙是一種能結合核酸的熒光染料,根據熒光顯微鏡濾光系統不同
,它呈現出明亮的綠色、橙綠色或黃色。有時,它被用來監測樣品
中的微生物生長,它與活細胞結合會發出明亮的橙光或綠光。