激發濾片和濾片組合影響熒光圖像的成像效果
觀察和記錄結果 熒光顯微鏡的原理。激發濾片和阻擋濾片的較佳組合對熒光圖像的強度和對比度起到了很重要的作用。另外,正確選擇合適的物鏡也很關鍵。通常選用數值孔徑(NA)較高的平面視野物鏡, 細胞制備物 由于制備物中不同細胞之間GISH的效率有所不同。因此,必須通過選擇正確的實驗材料,和進行染色體預處理等方法來使有絲分裂指數達到較大。對于熒光檢測而言,每個載玻片上細胞的絕對數目可能要比用于染色的少一些,這是因為在同一個顯微鏡視野中,熒光材料之間會相互干擾。較好做到,樣品中沒有細胞壁和細胞質,而且載玻片上沒有灰塵或其他光散射碎屑。 植物材料 若有全植株,細胞核應當從分裂旺盛的分生組織中分離,這里累積的代謝物較少,例如離體培養物的根尖,或者是正在完全發育的幼嫩植株的根尖?梢詮24h前澆水的盆栽植物上,或者從水培養的插條上取幼嫩的根尖。從植物組織中得到有絲分裂和減數分裂的實驗方法將在下面介紹。也可以直接從原生質體中收集正在分裂的細胞核。
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