復合細胞結構層析的應用實驗分析顯微鏡
親和層析的應用
用這種技術所純化的酶和其他蛋白質的數目急劇增加就
已經顯示了親和層析的巨大潛力。尤其是谷氨酞胺合成酶(一
種異構酶)一類。此外,也已純化了很多抗原、抗體和核酸。較
令人鼓舞的特色是這種技術可能提供了研究激素和藥物受體
以及其他復合的細胞結構的一種手段,而這些至今證明是十
分困難的。
在實驗室和工業生產的實用生物化學中日益顯得重要的
一種技術是所謂固相酶的使用。如同親和層析那樣,它是把
一種酶通過共價的結合,固定到一種不溶性的基質上,使它具
有了游離的酶所沒有的一些特殊的優點。被固定的酶增加了
對熱和蛋白水解酶的穩定性,并且能裝到柱里。在這種條件
下,當一種適當的底物溶液通過柱時,仍然能催化它的正常
反應,而得到一個沒有酶的產物,而留下的酶還可進一步使
用。另一種情況,在杯式操作中,不溶性的酶可以通過過濾或
離心來回收,而又不會失去其活性。在不溶性酶中所進行的
反應與親和層析中所談到的十分類似。
高壓液體層析
市場上供應的儀器,較近已發展了可在高壓下,通常用柱
層析法來進行化合物的分離。細鋼管中裝有固定相,移動的
液相用泵在壓力下通過柱。因此,柱可以做得比通常使用的
長得多,并且往往顯著地縮短了分離的時間。在這些條件下
也能應用吸附、液一液分配、離子交換和凝膠通透層析的原理,
因此這種技術的用途是很廣的。這種儀器通常附有一個或多
個檢測系統,能連續地監測從柱上流出的洗脫液。