花粉細胞封藏與玻片制作檢測生物圖像顯微鏡
整體封藏與切片
新鮮的或固定的微小樣品,可以不經切片直接鏡檢,例如花粉母細
胞、花粉、精細胞、用特殊方法人工分離出來的胚囊、卵細胞、合子等
,只有一層或少數幾層細胞的厚度,光線可以穿透,將它們整體封藏(w
hole mount)后光鏡檢查很方便。甚至含有多層細胞的組織,有時也可
整體觀察。例如,蘭科植物的胚珠十分微小(順便說一下,蘭科屬于微
子目),常常僅有一層珠被細胞,缺乏珠心組織,可以直接在顯微鏡下
看到內部的胚囊和幼胚。大的胚珠,有數十層外圍組織覆蓋內部的胚囊
,需要經透明劑(例如水楊酸甲酯,俗稱冬青油)處理后,才能透視內部
結構。整體材料的觀察方法有其優點,除制作快捷外,更重要的一點是
能顯示器官內各個細胞的三維空間關系,使人一目了然地獲得自然的立
體圖像。
但是,在大多數情況下整體封藏的材料畢竟難以洞察內部細胞的狀
態,這就需要將材料切成薄片才能觀察。談到切片技術的發展,較先可
以追溯到徒手切片(free—hand section)。用支持物(如胡蘿卜根)夾持
新鮮的或固定的材料,以鋒利的刀片作重復的切削動作,可以從大量的
切片中挑選出比較平整而薄的切片進行觀察?梢韵胂螅跗诘呐咛W
研究就是用這種簡單、原始的技術取得了許多重大發現。甚至直到20世
紀50年代,個別研究者還在使用徒手切片,觀察小麥子房的胚囊,看到
其中有生活原生質的運動。后來,在徒手切片的基礎上,發明了各種切
片機(microtome),可以控制切片的厚度,并且能獲得更薄的、均勻一
致的切片。有一種切片機稱為“滑走切片機”,多用于為較粗硬的材料
制作切片,成為木材解剖學中常用的技術。還有較遲發明的“振動切片
機”,可用來制作較厚的新鮮切片。但這些切片技術在植物胚胎學中應
用不廣。應用較廣而流傳較久的切片技術是石蠟切片(paraffin sectio
n)。