液體培養基中細胞微生物培養計數分析顯微鏡
培養法
培養法取決于在一個樣品設定條件的特定培養基中細胞的增殖能力
。較常用兩種培養方法是較大或然數法(MPN)和平板計數法。MPN測定是
將樣品在含有液體培養基的培養管中連續稀釋至3倍、5倍和10倍,然后
通過觀察一系列稀釋樣獲得該微生物種群密度數量級的估計值。但是,
標準的MPN方案推薦,每個稀釋樣至少注入3個(較好5個)平行的培養管
。孵化后,這些培養管被劃分為陽性(渾濁的——表示產生了生長現象)
或陰性(清澈——沒有生長跡象)。將每個陽性管稀釋液的樣品與根據統
計學得出的對照表對比,并按照稀釋因子進行修正得到MPN/mL。建立M
PN排列雖然工作量大但有其優勢。通過仔細選擇培養基,MPN方法能用
來量化具有特殊新陳代謝能力的微生物。在某種液體中馴化的微生物,
在用于平板計數的固體介質中可能不形成群落。用肉湯培養基可提高可
培養計數的復活率。
平板計數是將已知樣品(可能是mg固體或mL液體)配制成一系列緩沖
稀釋液。對涂布平板而言,從稀釋樣品中取0.1mL轉移到事先用含有所
需固體培養基澆注的培養皿上,然后,用彎成曲棍狀的消毒玻璃棒,把
轉移的液滴在培養皿表面均勻散開。對灌澆平板而言,將0.1mL樣品或
1.0mL稀釋的樣品移入未使用過的培養皿,將熔化的(約45℃)培養基倒
人培養皿里。輕輕地漩渦式轉動培養皿,讓樣品逐漸分散到整個培養基
,然后讓培養基在冷卻時固化。接下來的步驟對灌澆和涂布平板都是相
同的。