懸浮顆粒-生物顆粒和大分子觀察顯微鏡
界面對所分配物質有一定的吸附容量。對可溶性物質通常無
顯著影響,而對懸浮顆粒卻會產生較大量的界面吸附。因此,在分
離細胞顆粒時,事實上需考慮三相:上相、界面和下相,此時,兩
相系統的分離是基于顆粒在這些相之間的選擇性分配。
相必須是水性的
顯然,選擇合適的相系統是分配方法的關鍵。用于生物顆粒和
大分子分配的相系統有其特殊要求,如相必須是溫和的,即必須考
慮到其水含量、離子組成、滲透壓、從顆粒中洗提出物質的能力和
變性效應等因素。顆粒越大,越復雜,對環境要求也越苛刻。如蛋
白質往往能容許較廣范圍的pH及離子強度的變化,而細胞器則可能
對pH及鹽組成有嚴格要求。再者,為了能夠分離,這些物質又須有
不同的分配特性,即它們對兩相應有不同的親和性。
上面述及的某些因素排除了傳統的含有機溶劑兩相系統的應用
。這不僅是因為有機溶劑有變性作用,而且還因為在水—有機物系
統中生物顆粒和大分子幾乎總是完全分布于水相而無法分離。此外
,傳統相系統的液—液界面有較大的界面張力,易使脆弱的細胞結
構遭到破壞。
雙水相系統可以克服上述缺點,它們是由兩種不相溶的聚合物
水溶液組成。兩種不同聚合物溶于一給定溶劑時會導致分相,這是
個普遍現象。分相后聚合物水溶液中水的含量達85~99%。