利用計數板和電子計數器計數細胞-微生物計量圖像顯微鏡
利用計數板和電子計數器進行直接計數不能區分死活細胞,根
據活細胞能進行生長繁殖這一特點,人們設計了許多活菌計數方法
。一般是將適當稀釋的樣品涂布在瓊脂培養基表面,培養后活細胞
能形成清晰的菌落,通過計算菌落數就可知道樣品中的活菌數。若
使用專門的菌落計數器,計數結果會更精確。平板涂布和傾倒平板
均可用于活菌計數。
平板計數簡單、靈敏,廣泛應用于食品、水體及土壤樣品中活
的細菌和其他微生物的計數,但計數結果也受一些因素的影響。若
樣品中細胞聚集成團,沒有有效地分散,就會導致計數結果偏低,
由于不可能絕對保證每個菌落來源于一個細胞,平板計數法得到的
結果稱為菌落形成單位,CFU并不完全等同于樣品中的活菌數。在
平板計數過程中,樣品的稀釋度控制在使每個平板上菌落數在30-3
00個范圍內時,能得到較好的結果。當然,若使用的培養基不能滿
足樣品中所有微生物各自的營養需求,計數結果也會偏低。在使用
傾倒平板技術進行活菌計數時,若溶化的瓊脂培養基溫度過高,會
殺死或損傷一些對溫度較為敏感的細胞,因此乎板涂布技術所得的
計數結果有時會高于由傾倒平板法獲得的結果。涂布平板和傾倒平
板技術
微生物數量還可由濾膜培養法獲得,首先使樣品濾過一種特制
的,孔徑小于細菌個體的濾膜(membranefilter),然后將濾膜置于
培養基上或浸潤有液體培養基的墊狀物上培養,通過計算在濾膜上
形成的菌落數就可知樣品中的活菌數