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熒光顯微鏡下觀察細胞傷損實驗-顯微鏡測定技術




來源:yiyi
時間:2017-3-16 17:22:16

熒光顯微鏡下觀察細胞傷損實驗-顯微鏡測定技術


細胞損傷實驗熒光濾片,在熒光顯微鏡下觀察。
  無論從生物學或實用目的的角度出發,研究細胞損傷需要一些方法
,來鑒別在細胞培養或組織內常少數存在的受傷細胞。策略設計

  根據用正常不能滲透的大分子示蹤劑標記細胞質的原理鑒別受傷細
胞。細胞膜破裂,示蹤劑進入細胞質,然后破裂處封閉,示蹤劑位于細
胞內。死細胞的細胞膜破裂后不能封閉,只要洗去全部外源性示蹤劑則
不被標記。有幾種細胞損傷示蹤劑供選擇。熒光素標記的右旋糖酐比較
便宜,不同分子質量(5000~2 000 000)的右旋糖酐均可使用。如果使
用醛固定的標本,須用結合有賴氨酸的右旋糖酐。

  如果在顯微鏡測定或熒光測定方面可觀察到損傷示蹤劑,能夠鑒定
受傷細胞示蹤劑的優點是已知加入和除去示蹤劑的時間,如熒光素標記
的右旋糖酐。因此,可用于脈沖追蹤(pulse-chase)標記方案,以便確
定細胞損傷時間的選擇。白蛋白是一種很好的細胞損傷示蹤劑。在動物
整體研究中,白蛋白的突出優點是高濃度時許多組織的細胞外環境保持
正常。

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