熒光顯微鏡下觀察細胞傷損實驗-顯微鏡測定技術
細胞損傷實驗熒光濾片,在熒光顯微鏡下觀察。 無論從生物學或實用目的的角度出發,研究細胞損傷需要一些方法,來鑒別在細胞培養或組織內常少數存在的受傷細胞。策略設計
根據用正常不能滲透的大分子示蹤劑標記細胞質的原理鑒別受傷細胞。細胞膜破裂,示蹤劑進入細胞質,然后破裂處封閉,示蹤劑位于細胞內。死細胞的細胞膜破裂后不能封閉,只要洗去全部外源性示蹤劑則不被標記。有幾種細胞損傷示蹤劑供選擇。熒光素標記的右旋糖酐比較便宜,不同分子質量(5000~2 000 000)的右旋糖酐均可使用。如果使用醛固定的標本,須用結合有賴氨酸的右旋糖酐。
如果在顯微鏡測定或熒光測定方面可觀察到損傷示蹤劑,能夠鑒定受傷細胞示蹤劑的優點是已知加入和除去示蹤劑的時間,如熒光素標記的右旋糖酐。因此,可用于脈沖追蹤(pulse-chase)標記方案,以便確定細胞損傷時間的選擇。白蛋白是一種很好的細胞損傷示蹤劑。在動物整體研究中,白蛋白的突出優點是高濃度時許多組織的細胞外環境保持正常。
(本文由上海光學儀器廠編輯整理提供, 未經允許禁止復制http://www.xjwdx.com)