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視頻光學電子顯微鏡分析細胞內復合形態的動態結構




來源:yiyi
時間:2017-3-13 23:56:13

視頻光學電子顯微鏡分析細胞內復合形態的動態結構

    低溫免疫金電子顯微鏡術可在亞細胞水平檢測抗原,具有分辨
率高的特性。本技術涉及細胞或組織超薄冰凍切片的制備,并用免
疫金標記切片以定位抗原。由于不需要苛刻的有機溶劑如用于可塑
性包埋的有機溶劑,蛋白質抗原特性與精細超微結構的保持比傳統
的電鏡包埋法好。低溫免疫金標記時,葡萄球菌蛋白A結合的不同
大小的金粒子可用于標記與抗原結合的不同抗體,故可同時定位多
種抗原,而其他免疫電子顯微鏡術標記法則不能同時定位多種抗原
。如何運用低溫免疫金電子顯微鏡術標記標本,包括固定、包埋、
冰凍切片及標記。
    視頻光學/電子顯微鏡術(CVLEM),它集熒光顯微鏡術和電子
顯微鏡術于一身,用于分析細胞內具有復合形態的動態結構。該技
術通過監測表達熒光報告蛋白的細胞,如表達綠色熒光蛋白嵌合體
的細胞,來鑒定和監測感興趣的結構。首先固定細胞,然后用電子
顯微鏡通過三維結構重建的方法來分析同一個感興趣的結構。在標
本制備的各個階段,都有一定的技術要求。而該技術能以驚人的高
分辨率檢測細胞內復合結構的組織及形態,如Golgi復合體、膜轉
運介質及細胞骨架成分。

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