視頻光學電子顯微鏡分析細胞內復合形態的動態結構
低溫免疫金電子顯微鏡術可在亞細胞水平檢測抗原,具有分辨率高的特性。本技術涉及細胞或組織超薄冰凍切片的制備,并用免疫金標記切片以定位抗原。由于不需要苛刻的有機溶劑如用于可塑性包埋的有機溶劑,蛋白質抗原特性與精細超微結構的保持比傳統的電鏡包埋法好。低溫免疫金標記時,葡萄球菌蛋白A結合的不同大小的金粒子可用于標記與抗原結合的不同抗體,故可同時定位多種抗原,而其他免疫電子顯微鏡術標記法則不能同時定位多種抗原。如何運用低溫免疫金電子顯微鏡術標記標本,包括固定、包埋、冰凍切片及標記。 視頻光學/電子顯微鏡術(CVLEM),它集熒光顯微鏡術和電子顯微鏡術于一身,用于分析細胞內具有復合形態的動態結構。該技術通過監測表達熒光報告蛋白的細胞,如表達綠色熒光蛋白嵌合體的細胞,來鑒定和監測感興趣的結構。首先固定細胞,然后用電子顯微鏡通過三維結構重建的方法來分析同一個感興趣的結構。在標本制備的各個階段,都有一定的技術要求。而該技術能以驚人的高分辨率檢測細胞內復合結構的組織及形態,如Golgi復合體、膜轉運介質及細胞骨架成分。
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