菌種斜面培養和平板培養技術-菌種鑒別技術
1.斜面培養 將培養基注入試管中,滅菌后擺成斜面,可較長期
貯存備用。在出外采集蟲尸樣本時,可用小試管攜帶一些選擇性培養基
,隨時進行分離。接種時斜面試管上貼上標簽,注明接種菌名稱、日期
、接種人姓名等。斜面培養還是菌種保藏及運輸郵寄的方便方法,它封
閉嚴密,易避免雜菌污染。
2.平板培養 平板培養是將溶化冷卻到45—50℃的瓊脂培養基注
入滅菌的培養皿中,直徑9—1cm的培養皿注入12—15mL。輕輕轉動培
養皿,使之均勻分布,凝固后即成平板。接種好的平板,為防止水分蒸
發,要翻轉倒置于恒溫箱中培養,多數蟲生真菌不要求高溫,一般在25
=C左右為宜,培養5天以后再行觀察。
根據培養目的不同,接種方法也不同,為觀察菌落形態或測定菌落
直徑生長量應采取點植培養,通常自斜面上蘸取極少量孢子,點植于皿
的中心或成三角形的3點。為分離菌種則采用劃線分離培養和稀釋分離
培養。為計數活孢子數量,則采用稀釋接種培養。
稀釋接種培養方法有兩種,即基內接種和表面接種,基內接種是將
相應稀釋倍數的菌液1mI,用滅菌吸管先置于滅菌皿中,再把溶化冷卻
到50℃的瓊脂培養基注入,迅速搖動混合均勻(順時、逆時方向各10次)
,凝固后培養。表面接種是把0.1ml或0.2ml的相應菌懸液接種于平板
表面,再用玻璃刮鏟涂布均勻,培養后計數。