土壤微生物實驗室制備的培養基實驗圖像顯微鏡
實驗室制備的培養基
在土壤微生物的領域里,由于研究對象種類繁多,故在實驗室
里根據其構威成分制備培養基的情形較多。為此目的按培養基的組
成來稱量它的成分,溶解就可以了。這里介紹一下制備時需要注意
的幾點。
稱量成分一般用粗天平即可。這是因為培養基中各種成分含量
幾乎都是按經驗來確定的,并且做為營養物的物質,從它的性質上
看對濃度的要求也并不十分嚴格。溶解時一般用加溫的蒸餾水或脫
離子水。待一種成分完全溶解后再加入另一種成分,因為很多培養
基中都含有磷酸鹽,它與培養基中的鈣、鎂,鐵等反應生成沉淀。
如用磁力攪拌器溶解則更方便。另外,對于極微量的成分要預先制
成稀釋為100倍的單獨的溶液。
特別是在堿性條件下,經高壓滅菌后磷酸鹽沉淀更加顯著。一
般認為生成沉淀對微生物生長發育無妨礙。但對液體培養或用稀釋
平板進行生長測定有時有妨障。因此,為了防止沉淀的生成,采取
把生成沉淀的各種成分分開單獨滅菌,冷卻后混合的方法;或是把
制備好的培養基pH調到8,過濾后再調回到所要求的pH,然后再滅
菌的方法。
調pH一般用1M的鹽酸和氫氧化鈉水溶液。雖然培養基組分不同
,但高壓滅菌之后pH值都稍有降低的趨勢,這一點在調節培養基時
要注意。使用BTB試紙等測定pH值雖然很簡便,但試紙所示值往
往和玻璃電極pH計所示值不一致,所以要將pH計所示數值同試紙所
示色澤做對比,記住更好。使培養基凝固的瓊脂濃度通常為1.2—
1.5%?墒牵瑢τ谙竽蜔峒毦驼婢染涠鴶U散的微生物進行
計數時,采用瓊脂濃度為2%;檢查細菌運動則用o.5%濃度的半
固體瓊脂等,必須注意不同情況應有相當大的變化。