高壓滅菌所用的滅菌器是密閉耐壓的鍋-培養基的制備
培養基的制備
在幾乎所有的微生物實驗過程中,培養是不可缺少的重要操作
。很多情況下,不培養就檢驗不出微生物來,也就無從了解其性狀
。
培養基的選擇是從根本上影響實驗結果的關鍵問題。特別是象
土壤里面多種微生物混在一起時,要測定其梭生物數量,不管用什
么樣的培養基也不會把生存著的一切微生物幫培養出來。所以需要
充分了解所甩的培養基究竟主要能檢驗出什么性質的微生物。有關
培養基盼選擇將在第二章以后介紹,這里僅就一般的制備方法加以
說明。
在微生物的實驗中,這些操作多是以連續或平行的方式進行的
,但不能在同一實驗室里進行所有的過程。較為理想的是根據不同
的目的,設計符合各項操作要求的單獨的房間,但實際上有困難。
因此,從操作內容的性質上考慮,至少無菌室與其他房間要分開。
如果還有可能,則應分別設置儀器洗滌、干燥和高壓滅菌室。進而
設置恒溫室,把有關培養的裝置集中在一起。
高壓滅菌所用的高壓滅菌器是密閉耐壓的鍋,用煤氣或電力加熱。
鍋上安裝有壓力計和溫度計,用于觀察鍋內溫度和壓力。使用時,
先在鍋內加足水之后再加熱。用耐水紙和錫箔蓋在滅菌物質上面,
防止冷凝水沾濕滅菌物質和棉塞,同時,應待高壓鍋充分加熱之后
再放人滅菌的物件。蓋上鍋蓋,蒸汽大量增加,徹底排除內部空氣
,這時關上排氣口。待上升到所要求的溫度后,繼續加熱維持到規
定的時間。滅菌結束后切斷熱源,觀察內部溫度變化,當下降至80
℃左右即可打開鍋蓋。還有,象清蛋白瓊脂培養基那類加熱易發泡
的物質,用普通方法滅菌易污染棉塞,甚至有時內容物會冒出來。
這類物質滅菌時,先不蓋蓋,加熱一會兒,待滅菌物質溫度達1 00
℃,排除空氣之后再蓋蓋,可在一定程度上防止發泡。
高壓滅菌器的密閉部分常常發生故障,蓋的襯墊、溫度計等部
分容易損壞。蓋蓋時要均勻地擰緊螺旋,要緊的是切莫不必要地擰
得過緊。另外,空燒也能損傷高壓鍋,這樣,會使耐熱性減弱,容
易發生事故。安全閥要經常檢查。