微生物細胞化學物質的純DNA樣品測定顯微鏡
生物學和分子遺傳學的認識依賴于合適的研究工具的發展。對于核
酸是怎樣發揮功能的知識方面的進展一般與研究新方法的發展密切
相關。在此我們討論一些方法。
1.DNA的提取和純化。首先需要沒有其他細胞化學物質的純DN
A樣品。這個過程就是我們要說的DNA的純化。較后一步的水溶液用
RNAase處理以便除去RNA。蛋白質的去除是用變性溶液(通常是酚)
,通過幾次重復純化步驟,可以得到實質上很純的DNA溶液,而不
合任何其他雜質。
所得到的DNA溶液不是DNA分子在細胞中的天然長度。純化過程
會引起DNA的斷裂, 而形成各種長度的片段(無規則的)。如果在
純化過程中動作緩和,DNA片段的長度大約是完整染色體長度的百
分之一。
2.DNA的測定。有一些方法可用于溶液中DNA含量的測定,
一個應用較廣泛的方法是測溶液的紫外光吸收值,DNA在波長260nm
處有很強的紫外光吸收能力。這種吸收作用是由于嘌吟和嘧啶堿基
的存在。弱,這是由于雙股DNA中兩個對應鏈上的堿基之間相互作
用 (氫鍵)減弱了對紫外光的吸收。
3.DNA的密度梯度離心。DNA分子密度取決于分子內精確的化
學成分