瓊脂營養培養基上生成菌落的細胞數計量顯微鏡
活菌計數在剛剛描述的計數方法中,活細胞和死細胞都計算進去了
。在許多情況下,我們只對計算活細胞感興趣,并且為了此目的,
發展了活菌計數的方法。活細胞定義為可以分裂和生成后代的細胞
,并且一般進行的活菌計數就是確定樣品能夠在適宜的瓊脂營養培
養基上生成菌落的細胞數。在這種類型計數過程中是假定一個活細
胞只產生一個菌落。這里有兩種子板計數方法:涂布平板法和傾注
平板法。對涂布干板法而言,就是把濃度適當的量不大于0.1ml的
稀釋菌液,用一無菌玻璃刮刀涂布在瓊脂平板的表面。然后培養平
板,直到出現菌落,并計算菌落數。平板的表面保持千燥是非常重
要的,這樣可便.,?于菌液能滲入培養基中。一般加的菌液不會
大一一于0.1ml,因為多余的菌液不能滲入瓊脂培養基中,導致生
成的菌落相互重疊,難以計數。在傾注平板法中,用移液管一般吸
取0.1—1.Oml培養液加入到一無菌的空平皿中,然后加入熔化的
瓊脂培養基,并在桌面上輕輕旋轉使之混勻。因為這樣可以使培養
液與熔化的瓊脂混勻。在此法中使用的培養液是可以大于涂布平板
法中用的培養液量。但是在傾注平板法中,熔化的培養基溫度應在
4512左右,使微生物在短時間內能夠忍受,不至于被熱的培養基燙
死,