微口滴管小滴培養液-培養基檢查圖像顯微鏡
微口滴管滴分法 該方法是控制接種的每小滴培養液中盡量只含有一個硝化細菌細胞。首先用無菌的微口滴管吸取少量富集培養液的上清液,然后傾斜錐形瓶,使瓶底露出培養液液面,以微VI滴管尖端輕輕接觸錐形瓶底,如此接種硝化細菌于增殖培養液。同樣接種10。20瓶,28%恒溫箱培養3—4周,培養過程中同上檢驗NOr及N%-,檢查硝化細菌生長。 三種分離純化的方法中稀釋法簡便易行,分離效果較好。硅膠平板分離法可直接獲得純種。 純度檢查 硝化細菌培養過程,常會有異養型細菌伴生,因而必須用多種有機營養培養基檢查培養物是否污染異養細菌。通常用肉膏蛋白胨酵母培養基檢查異養型細菌,麥芽汁培養基檢查酵母菌,馬鈴薯葡萄糖培養基檢查霉菌。用上述培養基平板或斜面接種分離的硝化細菌,培養適當時間后若有細菌生長,表明分離的硝化細菌不純,需重新分離純化。如果沒有細菌生長,則分離的硝化細菌基本為純種。 顯微鏡鏡檢 對分離純化的硝化細菌進行鏡檢和革蘭氏染色
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