穿刺培養實驗-光合細菌的菌種培養檢測顯微鏡
方法與步驟
光合細菌的菌種培養
1.取球形紅假單胞菌和沼澤紅假單胞菌原種培養物,分別在M瓊脂培養基試管中穿刺接種,每種接二支。
2.取一支已穿刺接種的試管,加入混合石蠟液于試管頂部,以此與氧隔絕,置于28℃下,用2000~50001x強度光進行光照培養。}昆合石蠟液由液體石蠟和固體石蠟以1:1比例,加熱后混合配制而成。
3.另一支已穿刺的試管放入厭氧缸內,用焦性沒食子酸和碳酸鈉反應來消除氧,并用真空泵抽氣減壓,造成一個理想的厭氧環境(參見實驗1-9)。
4.與石蠟封蓋試管相同,置于28℃,光照下培養4~5天,在沿穿刺線上長出鮮紫紅色或橘紅色的菌苔時,表明接種菌已生長成功。
5.在厭氧缸中的培養管瓊脂頂部,加入1-2mL滅菌的液體石蠟進行保種。
光合細菌的增殖培養
1.在500ml磨口錐形瓶中加入已滅菌的范尼爾氏液體培養基,至接近瓶頸部。
2.取上述穿刺培養的光合細菌菌種,用接種環挑取部分培養物,轉入瓶內,然后用液體培養基加滿至瓶口,小心用瓶蓋蓋緊
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