固定體積培養介質細胞懸浮培養實驗圖像顯微鏡
懸浮培養的類型
分批培養
分批培養指在固定體積的培養介質中進行的細胞懸浮培養。在培養
過程中？細胞分裂和細胞生長使得懸浮培養物的生物量不斷增加。當培
養環境(可利用的營養和氧氣)中出現限制因子時，細胞停止生長，生物
量便不再增加。
培養時間的模式曲線
①滯后期：此期為細胞分裂做準備。
②指數期：細胞分裂速度較快。
③線形期：細胞分裂速度減慢，細胞伸長生長速度增加。
④減速期：細胞分裂和細胞伸長速率都減小。
⑤穩定期：細胞數目和大小保持恒定。
當細胞被轉移到新鮮培養基中開始培養時，細胞就處于滯后期，這
是分批培養的較開始階段，此時期的細胞還沒有分裂。滯后期的細胞可
用來分析特定代謝物的合成和某種生理活動的速率。緊跟滯后期的是細
胞分裂期(即指數期)，此時期持續的時間很短，指數期時，每單位生物
量濃度的生物量增加是一定的且是可以測量的。生物量通常是指每毫升
培養物中的細胞數目。一般地，在細胞分裂到3—4代后，細胞生長開始
降低，較后，細胞數目達到穩定期，此時細胞干重開始下降。穩定期是
分批培養中細胞生長周期的較后階段，此時生物量和細胞數量都沒見有
明顯的增加。培養時可以通過頻繁(周期為2—3d)地進行亞培養而使細
胞維持在指數生長期。由于細胞能利用胞內的儲備物和死亡細胞所釋放
的可再利用代謝物，所以細胞可以存活幾天。穩定期細胞的穩定性取決
于生長限制因子的種類和特點(如因氮缺乏而達穩定期的細胞的存活時
間比碳缺乏的要長)。處于穩定期的細胞被轉移人新的培養基進行繼代
培養后，細胞就依次通過滯后期、很短暫的指數生長期、相對生長速率
下降時期，接著又再次進入穩定期。進入末期前，細胞的體積在增大。
一般按照慣例，每次繼代培養都是開始于相對較高的細胞密度，所以再
次進入穩定期前，細胞只進行有限的分裂(細胞數目加倍)。
一般來說，細胞懸浮培養的目的是獲得生長速率較快、均一的細胞
，而且所有細胞都是活的。在適當的培養基中頻繁地進行繼代培養，獲
得的細胞就可以同時具有這些特點。如果懸浮培養的細胞是用于做實驗
，則繼代培養的時間間隔不要超過一周。
