單細胞培養分離實驗倒置生物顯微鏡-配備計數軟件
單細胞系都是從培養的組織中分離得到的。開始培養時,首先把從植物器官切割下來的新鮮外植體轉移到含有合適生長調節物質的固體培養基上。在此培養基上,外植體產生愈傷組織,可以把此初始愈傷組織與外植體分離,重新轉移到新鮮培養基上培養,從而得到合適數量的愈傷組織。這樣的愈傷組織就可以轉移到液體培養基中,振蕩培養得到好的懸浮細胞。懸浮培養能否成功主要取決于初始愈傷組織。有多種外植體和培養基配方被用于成功誘導愈傷組織的產生等。在這些配方基礎上改變或調整的培養基也被廣泛使用。
在這些培養基中加入了維生素、肌醇、蔗糖和生長調節劑,特別是加入細胞分裂素使細胞發生分裂,當加入lμmol/L的激動素時,細胞分裂效果較好。誘導產生的愈傷組織的生長速率和脆弱性因外植體的不同而有很大差異。用于懸浮培養的培養介質要能夠使愈傷組織生長良好。
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