固體培養基的配制-培養基觀察分析顯微鏡
固體培養基的配制
配制固體培養基時,先配好相應的液體培養基,然后加入適量
的瓊脂(鞘)(如按瓊脂質量百分比濃度1%~1.5%添加),用玻
璃棒攪拌混勻,滅菌。
培養基配好后,要馬上滅菌,否則會生長微生物,消耗培養基。
有些營養成分如維生素、抗生素等,要等到培養基冷到適當溫度時
在無菌條件下加入,否則會因溫度高破壞這些活性成分。
培養基的分裝
根據不同需要,可將已配好的培養基分裝入試管或錐形瓶內。
1.培養基分裝于試管
用移液管取適量的培養基轉移到各試管中。裝入試管培養基
的量依目的而定,一般液體培養基可分裝至試管體積的1/4左右。
對于從大腸桿菌提取質粒的實驗,可以把液體培養基等分分裝于
1.5~2mL的一次性小塑料離心管中,在接種了細菌后,蓋好這些
小塑料離心管,置于錐形瓶中搖蕩,以培養這些細菌。分裝固體或
半固體培養基時,對于瓊脂培養基,水浴加熱至瓊脂全部融化,在
不少實驗室,加熱用微波爐完成。在瓊脂完全融化后,應趁熱(約
45℃時)分裝于試管中。一般用于制作斜面的固體培養基分裝量
為試管體積的1/5,半固體培養基分裝量為試管體積的1/3。
培養基分裝于錐形瓶
用于搖蕩培養微生物用時,一般在錐形瓶中加入1/5體積的
液體培養基。用于制作平板培養基用時,在250mL錐形瓶中加入
150mL培養基,然后再加入2.29瓊脂粉(按質量百分比1.5%計
算)。滅菌時瓊脂粉被融化,滅菌后瓊脂培養基適當冷卻,趁熱(約
45℃時)分裝于需要的容器(如培養皿)。
(四)棉塞的制作及試管、錐形瓶的包扎
為了培養好氣性微生物,需提供優良的通氣條件,同時為防止
其它微生物污染,應該讓進入試管或錐形瓶內的空氣通過一道過
濾屏障,通常方法是在試管及錐形瓶口加上棉塞等。當用一次性
錫紙時,由于錫紙具有良好的成形性,所以用二層錫紙包住瓶口
(或管口)即可。