涂片(Smears)就是將一環微生物培養物涂在載玻片上
涂片
涂片(Smears)就是將一環微生物培養物涂在載玻片上,可以用來觀
察死的微生物。微生物剛放到載玻片時是活的,但經固定步驟就將其殺
死了。制作涂片常是初學者的難點。如果涂片涂得太厚,就難以觀察單
個細胞;而如果涂得太薄,就可能會找不到微生物。如果將那滴培養物
涂在載玻片上時攪得太厲害,又會破壞細胞原來的排布。這樣,通常以
四聯體形式(四個一體)存在的微生物就會被看成是單個或成對的菌體。
這常常會使初學者誤以為他們看到了多種微生物,而事實上,它們都屬
于同一種微生物。
涂片后應使其完全風干。然后將其快速通過火焰3~4次。這個過程
稱為熱固定(heat fixation)。熱固定主要有三個目的:①殺死微生物
;②使微生物黏附在載玻片上;③使菌體更容易染色。如果載玻片還沒
在完全風干,你就將其在火焰上移動,菌體就會煮沸而被破壞。如果熱
固定不夠,菌體就無法粘在載玻片上,在后續步驟中易被沖洗掉。任何
活細胞都很難著色。如果熱固定過度,微生物將會被燒毀,你會看到被
破壞的細胞和細胞殘骸。微生物的某些結構(如莢膜),經過熱固定就會
被破壞,所以應省略這一步驟,只需通過風干使之粘附到載玻片上。