相襯顯微鏡用特殊聚光器和物鏡來強化生物不同結構
相差顯微鏡
許多染料都會殺死微生物，因而多數微生物活體無法進行染色觀察
。不經染色就觀察活菌體則需要采用相差顯微鏡(Phase-contrast micr
oscopy)技術。相差顯微鏡用特殊的聚光器和物鏡來強化生物不同結構
的折射率差異。光通過具有不同折射率的物體時會減速并發生衍射。不
同介質中光速的差異就會導致亮度的不同。諾爾馬斯基(微分干涉差)顯
微鏡
和相差顯微鏡一樣，諾爾馬斯基顯微鏡(Nomarskimicroscopy)也是
利用折射率的差異來觀察未染色細胞及其結構。但微分干涉差顯微鏡的
分辨率比標準相差顯微鏡更高。由于景深(始終處于焦距的標本厚度)很
小，它能產生近乎三維的圖像。
熒光顯微鏡
熒光顯微鏡(Fluorescence microscopy)利用紫外線照射激發分子
，使其釋放出波長比入射光更長的光。不同波長的光呈現出不同亮度的
橙色，黃色或黃綠色。有些微生物，如假單胞菌(Pseudo一17zonas)，
受紫外線照射時會自然發出熒光。而另外一些微生物，如結核分支桿菌
(Mycobacterium tuberculosis)和蒼白密螺旋體(Treponema pallidum
，梅毒病原菌)，必須經發熒光的染料即熒光染料(fluorochrome)處理
后，它們才能在黑色背景下突現出來。吖啶橙是一種能結合核酸的熒光
染料，根據熒光顯微鏡濾光系統不同，它呈現出明亮的綠色、橙綠色或
黃色。有時，它被用來監測樣品中的微生物生長，它與活細胞結合會發
出明亮的橙光或綠光。
