微生物的酶PH測定水解反應-實驗室專業顯微鏡
人們把在特定條件下~分鐘內可催化1微克分子的底物轉變成產物所需要的酶量定為i個酶活力單位。特定條件包括pH值、底物的濃度和溫度。曾經提出了各種標準溫度,但實際上所用的溫度是根據所研究的酶的生物來源而定的。因此通常是在37℃測定取自溫血動物的酶,而可以在較低的溫度(如25℃)下測定取自微生物的酶。以醇脫氫酶為例,知道了1克分子的NADH溶液的光吸收,那么就能得到單位時間內NADH形成的量,因此也就得出了酶活力的單位數。
在水解酶的研究中,大多是利用從鄰位和對位硝基苯酚衍生來的合成底物 pH測定:許多反應,特別是水解反應,可產生酸性產物。芳基硫酸酯酶產生硫酸,所以這個反應在非緩沖溶液中可用一靈敏的pH計來追蹤。在這種方式中所用的技術固有的不利之處是pH經常在變化,而這點進而就很可能影響對PH的改變敏感的酶活力。為了克服這一點,已制造出一種稱為pH穩定計的儀器,這種儀器可以監控PH,在適當時候加入酸或堿,以保持pH恒定,并按時記錄加入的量。
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