顯微鏡通常配備有3—4個物鏡-生物暗視野觀察
顯微鏡通常都配備有3—4個物鏡,其放大倍數分別在4×到100 ×之間。物鏡的工作距離指的是在準確的焦點狀態下透鏡的外表面 與蓋玻片(如果使用的話)表面或與被觀察樣品之間的距離。數值孔 徑值越大、分辨率越高,物鏡的工作距離就越短。
在有效放大范圍內,放大倍數越大,能看清的被觀察對象越小 。人眼的分辨能力在0.2 mm,因此物鏡的有效放大倍數的極限是 其數值孔徑值的l 000倍。大多數標準顯微鏡使用10×目鏡,在使 用油鏡時達到其較高放大倍數,即1 000×。在使用高質量的物鏡 時,也可以配備15×目鏡,從而獲得l 500×的有效放大倍數,但 在此基礎上進一步提高放大倍數將并不能使我們看到更多的細節。 使光學顯微鏡的總放大倍數達到10 000×是完全做得到的,但這種 放大將僅僅是將一個模糊的斑點進一步擴大而已。而電子顯微鏡具 有足夠高的分辨率,可以保證更高的有效放大倍數。
恰當的樣品照明對顯微鏡的分辨率也非常重要。在光源和樣品 之間安裝凹面鏡的顯微鏡所形成的錐形照明光束很窄,數值孔徑 值也低。而在載物臺下方安裝鏡臺聚光器可以改善顯微鏡的分辨率 。作為一個大的集光透鏡,聚光器可以形成寬的錐形光束投射到載 片并進入物鏡,從而增加數值孔徑值。
暗視野顯微鏡 通過對照明方式進行簡單的改變,可以對活的細胞及生物進行觀 察。將一個中空的光束在樣品上聚焦,只有被樣品反射或折射的光 線才能進入物鏡形成物像,其他未經反射或折射的光線不能進入物 鏡,使得在明亮物像周圍形成黑的背景。正由于這種顯微術視野的 背景是黑色的,因此被稱為暗視野顯微術。暗視野顯微鏡可被用于 對一些細菌進行鑒定,例如體形很薄并具有特定外形的梅毒病原體 梅毒螺旋體。很多細胞較大的真核微生物的內部結構也能用暗視野 顯微鏡進行觀察。 |