選擇光學顯微鏡的物須考慮其放大率和工作距離
物鏡
當選擇物鏡時,必須考慮其放大率和工作距離。工作距離是指當所觀察的標本較清楚時物鏡的前端透鏡下表面到標本蓋玻片上表面的距離。換句話說,工作距離定義為物鏡不能進去的“禁區”。如果一旦物鏡進入該區域,將會出現下面兩種情況:物鏡將會因為接觸到蓋玻片或者是較硬樣品的表面而受到破壞;由于無法對焦造成圖像模糊。因此為了確保物鏡安全,在操作時需要特別注意。
每一個熒光團都有不同的光漂白特性。對于激光共焦熒光顯微鏡來講,光漂白是較大的問題,因此實際測試中需要考慮避免或減輕光漂白程度。因此在激光共焦熒光顯微鏡測試中,需要選取合適的染料,該染料可以在正常激光強度照射下較大程度減輕光漂白程度。當具有光漂白的染料用于測試中,以下三種方法可以降低光漂白程度:盡可能用低的激光強度;盡可能降低照射的時間(實際測試中,盡快完成一次測試);采用自由基清除體。
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