微型生物測定技術-細菌微生物分析圖像顯微鏡
微型生物的細胞活性測定技術
各種熒光探針和染色技術使我們認識到，無論是自然環境中的
細菌群落，還是純培養群體，都由生理狀態各異、不同代謝活性的
細菌組成。因此，以前那些認為細菌個體問無生理差異，不考慮個
體間代謝狀態的不同，僅以細菌的總豐度為基準計量得到的生物參
數結果存在著嚴重偏差。原因很簡單，那些休眠的、凋亡的、不具
備生理代謝活力的細菌，當然沒有生態功能上的貢獻。也就是說，
自然細菌群落中存在一部分“不作為”細菌。而真正對我們有用的
卻是那些有代謝活力的細菌。這就告訴我們，要正確的全面的了解
細菌在水生生態系統中的作用，就必須知道細菌的活性組成。現在
，我們能海洋微型生物生態學將細菌群體區分為可分裂的有繁殖活
力的類群、具有合成代謝活力的類群、具有呼吸代謝活力的類群、
膜完整的類群、已經死亡但尚未降解的類群等等。關于自然環境下
細菌生理狀態的存在形式的描述也日益增多，如活的但不可培養的
、受脅迫的、有損傷的、休眠的、凋亡的等。這樣劃分生理類型
主要是基于我們的微生物生理學認識。可以說細胞活性的研究就是
細胞的各種生理代謝狀態的確定。
細菌活性的劃分
在自然狀態下，各種各樣的原因導致了細菌生理異質性的發生
。處于自然水域中的浮游細菌面對隨時改變的環境，如太陽輻射、
有害物質、營養的可得性、溫度、氧分壓等等。有些環境條件的改
變對于他們來說是致命的。他們具有在新環境下改變自身以適應環
境的能力。另外微生物本身的變異和細胞周期行進的不同，也會造
成生理型差異。
要想確定細胞的生理活力情況，就要有一些單細胞水平上的活
力指標。通常作為細胞活力指標的一些細胞生理參數主要有以下幾
方面細胞膜的完整性
具有完整細胞膜的細胞，可以將細胞內容物和外部環境分隔開
，從而形成獨立的內環境。膜的完整性反應了細胞的內部組分是否
受到有效保護，完整的細胞膜使得細胞與其他的有機物和有機殘體
相區別。一旦細胞膜受到損害，細胞就不能維持其基本的電化學梯
度，這樣的細胞通常被認為是死細胞，因為他的內含物完全暴露于
外界環境并較終被降解掉。膜的完整性測量不需要細胞存在代謝活
力，因此這一參數同樣適用于饑餓的、休眠的和受傷的細胞。這些
細胞往往需要先激活或復蘇才能進行較復雜的代謝功能(這些細胞
結果間無差別)。所有的細胞都存在DNA，這使其成為了理想的染色
對象，但單獨使用可能和其他的生物殘體和死細胞產生的信號相混
。將DNA染色和對包圍保護DNA的選擇性半透膜的檢測相結合，可說
是更合適的方法
