顯微鏡觀察水溶液中標本較好選用浸水式物鏡
觀察水溶液中的標本(如活標本)時較好選用浸水式物鏡。較近
幾家顯微鏡廠商專門為使用共聚焦顯微鏡觀察生理狀態下的標本而
設計了大數值孔徑的浸水式物鏡。該物鏡與之前所用的浸水式物鏡
不同，它可供觀察固定在蓋玻片下方的標本，工作距離約為250微
米。
油浸物鏡的數值孔徑可比浸水式物鏡的數值孔徑大。盡管目前
有些油浸物鏡的工作距離約為200微米，但大多數油浸物鏡的工作
距離都相當短(約為100微米)。只有用與浸油折光率匹配的介質固
定標本時，才能選用長工作距離的油鏡。如果選用含水的固定介質
，則標本內厚度超過20微米左右處的圖像效果將明顯下降，圖像效
果下降是由球面像差造成的。此外，z軸上的距離檢測也需要校準
。物鏡移動(d。K)所引起的標本內焦平面移動幅度(d。)取決于標
本折光率與浸入介質折光率的比值針孔大小是影響成像質量的重要
因素。與第一個較小艾里斑半徑(近似于達到較大強度一半時的半
徑)相同的針孔，允許來自焦平面的大部分光線到達檢測儀，同時
阻止來自離焦區域的大部分光線通過。盡管它的橫向分辨率不如選
用更小的針孔，但卻比選用同樣光學系統的傳統顯微鏡要高20％。
在針孔半徑逐漸減小至約0．2×艾里斑半徑的過程中，橫向分辨率
隨之逐漸提高，但是如此小的針孔將導致95％的信號不能通過。
