用相差顯微鏡檢查培養瓶，觀察細胞生長或形態
制備瓊脂平板
1b．在電阻為10(或更高)的蒸餾水或去離子水中，依照生產商
提供的處方制備胰酶解酪蛋白大豆瓊脂、Sabouraud葡萄糖瓊脂和Y
M瓊脂。用一個至少兩倍于培養基的耐高壓容器盛放培養基(如用2L
錐形燒瓶Erlenmeyer盛lL培養基)，可避免高壓消毒過程中液體溢
出。在緩慢排氣或液體循環程序中，121℃高壓蒸汽滅菌培養基15r
ain。于近50℃水浴冷卻。無菌條件下，以50ral／L(5％)比例，將
去纖維蛋白羊血加入到胰酶解酪蛋白大豆瓊脂中。無菌條件下，在
lOOmmX 15mm一次性無菌塑料平皿中分裝培養基，24ml／111]．。1
0～20個平板疊放在…慈，室溫冷卻凝固，過夜。然后裝入有通氣
孔的塑料袋內，4～8℃儲存，質控檢查后備用(保質期12周)。冷凍
安瓿的樣品制備：用1支lml血清學吸管從準備細胞冷凍的各個管中
取細胞懸液約5％，均勻混合。
細胞培養瓶：用低倍倒置顯微鏡，
較好是相差顯微鏡，逐一檢查培養瓶，觀察細胞生長或形態是否有
異常。無菌條件下從可疑污染的培養液中吸取5ml培養上清液做進
一步檢查測試。隔離可疑的培養物或器皿，確保它們不與潔凈物品
產生交叉污染。8．濕封待測的樣本，然后在油鏡(放大率≥1000×
)下檢查。9．如果培養液中含抗生素，在進行培養基微生物檢測之
前洗滌細胞。20009離心20min
(室溫或4～8℃)，去掉上清液，用不含抗生素的培養基重懸沉淀
。如此步驟需重復
3次，徹底清除微量的抗生素，以免干擾微生物培養。
