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培養動物細胞時需采取特定的方法-細胞顯微鏡




來源:yiyi
時間:2016-12-22 0:46:51

培養動物細胞時需采取特定的方法-細胞顯微鏡

動物細胞非常適宜用于生產需進行大量且精確轉錄后加工的蛋白質
、具有生物活性的組織(人造皮膚)、疫苗及作為殺蟲劑的病毒。
    和培養細菌、真菌或酵母細胞相比,培養動物細胞更加復雜、
精細。這些特點決定了培養動物細胞時需采取特定的方法。
    關鍵區別是初級細胞系(從組織中直接得到)和從初級細胞系得
到的次級細胞系。正常的細胞系是會衰亡的,它們分裂的次數有限
。其他細胞系是轉化的或非衰亡的,可以無限制地分裂。許多細胞
系只有吸附在固體表面上才會生長,這些細胞系是貼壁依賴性細胞
。一些細胞,特別是轉化細胞系可以懸浮生長。一種特別重要的可
懸浮培養細胞是雜交瘤細胞。該細胞是能產生抗體的衰亡細胞與轉
化細胞雜交而成的,它是非衰亡性的、容易培養的細胞系,能夠生
產單類型的抗體,或單克隆抗體。    ·
    動物細胞生長的培養基必須能夠提供多種生長因子、葡萄糖、
谷氨酰胺、氨基酸、特定無機鹽以及維生素。在特殊情況下還需添
加動物血清(特別是哺乳動物的血清)。但是血清價格非常昂貴,而
且增加了感染的概率,成分也不確定,產品批次間存在一定差異,
還增加了下游回收蛋白質產品的困難。多數情況下,根據對細胞營
養的需求可以開發無血清培養基,無血清培養基的使用越來越重要

    許多潛在的生物反應器結構都適用于商業化的動物細胞培養。
設計反應器時關鍵問題在于提供充足的氧氣和營養,以及足夠的表
面積(對貼壁依賴性細胞而言)來達到高細胞密度,同時盡量不要使
細胞暴露于液體剪切力下。同樣,還須努力實現將培養基完全利用
以及達到高產物濃度。設計時還需盡量減少有毒性副產物(如乳酸
、氨)形成,或者能有效將這些代謝物從細胞生長的微環境中移除

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