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單細胞藻類、細菌和細小懸浮材料研究電子顯微鏡




來源:yiyi
時間:2016-1-22 17:08:03

單細胞藻類、細菌和細小懸浮材料研究電子顯微鏡

固定材料的制備

用于電子顯微鏡術的植物材料的制備比動物容易,因為
細胞從機體上取下不會迅速死去。但一個細胞內個別的細胞
器可能對損傷刺激產生強烈反應,故損傷要保持在較低程度。
要記住的主要規則是固定液浸透不到組織的很深處,所以要
固定的組織必須是薄片形狀,或者較好是很小的立方塊。
    把小塊的葉片、莖等直接置于固定液內,細胞的表面層會
受到機械損傷,以后必須去掉,而每一小塊或小片的內部將會
適當地固定。假如太厚則里面部分固定很差,在脫水過程中
將表現出來,切成條狀或片狀對于必須保持特殊的方向時是
有用的。  
    單細胞藻類、細菌和其它細小的懸浮材料可通過離心把
它們沉淀成松散的小球,然后輕輕地把它們懸浮在固定液內。
固定以后把懸浮液離心,把沉淀小球再懸浮到少量的經加溫
的2%瓊脂里,然后在載玻片上滴成小滴,如果量比較大,則
在培養皿中鋪成薄層。凝固以后,把瓊脂切成小塊,這樣便可
把它作為組織塊進行脫水和包埋。


醛固定液
    甲醛是醛固定液中較早應用的,由于包埋在甲基丙稀酸
酯中時引起組織損傷,所以開始是失敗的;較近用環氧樹脂作
包埋介質解決了這些問題。 
    一些植物材料具有厚的壁,用鋨酸保存得不好,因為鋨酸
固定液不能適當地浸透;先用甲醛固定接著用鋨酸固定常常
是成功的。醛類固定液和鋨酸不同,它沒有破壞酶活性的效
應,可以在切片上進行組織化學研究。如要進行組織化學研
究,則不能將組織用鋨酸作后固定,醛類不能用巴比妥緩沖液,
因為它們互相反應,其它任何緩沖液都合適。

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