細胞培養的無菌技術-細胞生物學研究顯微鏡
細胞培養的無菌技術
微生物無處不在,它們造成污染的可能性也處處存在。細胞培
養成功操作較基本的要點是:任何將與細胞接觸的物品必須是無菌
的或沒有污染的。要解決培養中的污染問題是一件煩瑣的、令人沮
喪的、沒有成功把握的工作,因此,較好的策略就是防止微生物污
染的發生。
無菌技術
無菌技術在理論上是很簡單的:阻止無菌的、未被污染的物質
或物品與任何有菌的、被污染的物體相接觸。成功的無菌技術的一
個基本因素就是個人衛生。任何直接或間接地與培養相接觸的物品
必須無菌。理想化的情況是所有無菌操作都應該在一個層流式超凈
臺中進行。如果是在一個敞開的空間進行無菌操作,火焰滅菌則通
常是一種直接的、局部的滅菌方法。由于火焰形成的湍流會極大地
打亂無菌氣流,因此火焰滅菌法應盡量少用。
細胞運輸的準備
當單層貼壁細胞生長接近匯合狀態、懸浮細胞生長到所需濃度
時,用25cm2培養瓶進行運輸比較容易。首先倒掉瓶中培養液,裝
滿新鮮培養液;懸浮細胞培養瓶則直接加滿新鮮培養液。裝滿培養
液可防止運輸途中由于瓶子翻轉而導致細胞變干。瓶蓋要擰緊并用
膠帶封閉。將培養瓶密封在一個防漏的塑料袋或其他防漏容器內,
這樣可預防瓶子損壞后液體滲漏。再將這個一級容器放入二級隔離
容器內,可避免運輸途中溫度急劇變化。外包裝盒上還應粘貼生物
危險品標簽。一般地,培養物應在當天或過夜就到達目的地。