測量總蛋白質檢測和分析-分光光度法測量
蛋白質的檢測和分析
在蛋白質純化過程中，需要進行兩種測量，較好對每個組分都
進行測量。必須測量總蛋白質和目的蛋白的量(通常是測量生物學
活性)。大多數常用分析方法的。沒有一種確定蛋
白質是否存在的方法，就不可能分離蛋白質，因此，必須要有一種
分析方法(定量的或至少半定量的)來確定哪種組分中含有大多數的
目的蛋白。
有的分析方法方便、快捷(如酶活性的即時分光光度法測量)，
有的則是既耗時又繁瑣的生物學分析。后者可能需要幾天才能出結
果，而且這種情況很棘手，因為當知道了蛋白質在哪個組分時，蛋
白質可能由于降解或失活已經丟失，而且，這種丟失直到下一步完
成并對其產物進行分析后才能清楚。因此，任何快速的分析方法都
具有優勢，盡管往往會由于加快了分析速度而降低了準確性。
測量總蛋白質很有用，因為這可以表明每一步的純化程度，但
除非下一步特別依賴于有多少蛋白質存在，否則總蛋白質測量也并
不是十分重要，可以留出一個小樣品，當純化完成后再進行測量。
然而，知道較終產物(假設是純樣品)中有多少蛋白質則十分重要，
因為據此可以計算比活(如果該蛋白質有活性的話)，并可與其他制
備物的比活進行比較。通常的目標是獲得盡可能高的比活(考慮到
回收率)，這意味著要保留盡可能多的目的蛋白，而較后總蛋白質
的量則越少越好。蛋白質分離和純化方法
蛋白質純化的現有方法范圍很廣，從簡單的沉淀(從19世紀就
開始使用)到復雜的層析和親和技術，后者不斷地得到發展和改進
。方法可被分成幾種不同的類別(或許較好的一種是基于正在研究
的蛋白質的特性)，如根據蛋白質的特點，可以將方法分成明顯不
同但又相互關聯的4組：表面特征、結構、凈電荷和生物學特性。
