光學顯微技術包括光學顯微鏡技術和光學顯微制片技術
光學顯微技術
顯微技術
人體的細胞一般小于20腳,是肉眼無法分辨的,因此需借助顯微鏡
進行觀察分析。目前普遍使用的是復式光學顯微鏡,它是根據光學原理
,使用一組玻璃透鏡再加上精密的機械工藝制成的儀器。光學顯微技術
是指通過光學顯微鏡觀察物體的技術。由于細胞一般無色透明,直接用
顯微鏡觀察不易分辨其結構,而往往需要經過制片處理。因此,光學顯
微技術包括光學顯微鏡技術和光學顯微制片技術兩部分。
光學顯微鏡技術
光學顯微鏡是利用可見光作光源,通過一組玻璃透鏡包括目鏡、物
鏡、聚光鏡放大被觀察物體,提高分辨力的儀器。所謂分辨力,指人眼
在25cm的明視距離處分辨物體結構較小間距的能力。一般光鏡的分辨力
為0.39μm,放大倍數可達1600倍。根據不同的用途,光學顯微鏡可分
為以下幾種類型:①普通光學顯微鏡,用于細胞一般形態結構的觀察,
可看到細胞核、核仁、細胞膜、線粒體、中心體、高爾基體、染色體等
。是應用較為廣泛的顯微鏡。②相差顯微鏡,在普通光鏡的聚光器上加
一個環形光闌,在物鏡的后焦面加一個相板制成。其原理是通過改變光
線的振幅差,提高細胞結構的對比度而提高分辨力。主要用于活體細胞
的觀察。③暗視野顯微鏡,可在普通光鏡的聚光器中央加一塊遮光板,
使照明光線不直接進入物鏡,只有經過標本的散射光進入,這樣視野的
背景是黑暗的,而被檢物體為亮點,暗視野顯微鏡也適于觀察活細胞,
但不能用于細胞內部結構的觀察。④熒光顯微鏡,以非可見光紫外光和
藍紫外光作光源,激發標本中的熒光物質使其發射熒光,可用于細胞特
殊結構的觀察。紫外光或藍紫外光由特制的濾光器或濾光系統產生。細
胞中的某些物質如葉綠體能自發產生紅色熒光,而有些結構如男性人體
細胞的Y染色體等則需經過熒光染料如口丫啶橙等染色才能產生熒光。