用于顯微熒光測量的儀器為顯微熒光分光光度計的應用
用于顯微熒光測量的儀器為顯微熒光分光光度計(microspectrofluorimeters)
該儀器主要為用于熒光激發和發射光譜的定量而設計的?也可測量透射和反射光譜。利用落射系統還可同時記錄熒光發射和在激發波長的透射。 顯微熒光測量時,未知物熒光與標準物熒光相比較才能精確定量。 熒光標準物的必要條件是:①與被測量的熒光體相同,或至少是具有相等或相似熒光激發和發射光譜的熒光體;②具有好的重復性;③足夠的穩定性。一個與蛋白結合的熒光色素的熒光特性與未結合的熒光色素并不相同。 所以,一個熒光色素的溶液可能不適合作為已結合熒光色素的標準物。若無標準物,只能對不同實驗組進行相對定量比較。 顯微熒光測量在熒光標記和免疫熒光標記中應用較多。神經組織中的兒茶酚胺、神經通路的熒光標記、酶、肽、蛋白質的免疫細胞化學等研究中均可采用顯微熒光測量方法進行定量測定。近年來應用較多的流式細胞光度計也常采用熒光標記測定方法。
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