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用于顯微熒光測量的儀器為顯微熒光分光光度計的應用




來源:yiyi
時間:2016-11-14 9:57:37

用于顯微熒光測量的儀器為顯微熒光分光光度計的應用

用于顯微熒光測量的儀器為顯微熒光分光光度計(microspectrofluorimeters)

該儀器主要
為用于熒光激發和發射光譜的定量而設計的?也可測量透射和反射
光譜。利用落射系統還可同時記錄熒光發射和在激發波長的透射。
    顯微熒光測量時,未知物熒光與標準物熒光相比較才能精確定
量。
    熒光標準物的必要條件是:①與被測量的熒光體相同,或至少
是具有相等或相似熒光激發和發射光譜的熒光體;②具有好的重復
性;③足夠的穩定性。一個與蛋白結合的熒光色素的熒光特性與未
結合的熒光色素并不相同。
    所以,一個熒光色素的溶液可能不適合作為已結合熒光色素的
標準物。若無標準物,只能對不同實驗組進行相對定量比較。
    顯微熒光測量在熒光標記和免疫熒光標記中應用較多。神經組
織中的兒茶酚胺、神經通路的熒光標記、酶、肽、蛋白質的免疫細
胞化學等研究中均可采用顯微熒光測量方法進行定量測定。近年來
應用較多的流式細胞光度計也常采用熒光標記測定方法。

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