相差光學顯微鏡用于觀察細胞不同結構之間細微差別
使用明視野顯微鏡并不能夠清楚觀察未染色的活細胞及其內部結構
,這是因為細胞與水環境或細胞內部結構之間的對比度太小。不過
細胞的不同結構之間確實存在密度上的細微差別,從而能夠將通過
其中的光線有所改變。相差光學顯微鏡(以下簡稱“相差顯微鏡”)
可以很容易的將這種細微的改變轉化成為可檢測出的光強變化。因
此這種顯微鏡非常適用于觀察活細胞。
與普通光學顯微鏡相比,相差顯微鏡有另外兩個部件:一個是
位于物鏡后聚焦面的相板;另外一個是與相板相匹配的位于聚光器
上的環形光闌,它是一個黑色圓盤,上面帶有一個透明圈。相板上
有一環狀區域,經過其中的光線不會發生改變,而經過環狀區域以
外的其他區域的光線則會被延遲1“波長(入)。
【實驗方法】
1.制備枯草芽孢桿菌水浸片。
2.將標本置于載物臺上。
3.先轉至10倍物鏡,同時將環形光闌也調至10倍位置,用粗調
節旋鈕和細調節旋鈕將物像調至清晰。
4.將目鏡取下,換上合軸調整望遠鏡,調整至亮環與暗環都
清晰,固定合軸調整望遠鏡。
5.調節聚光器至兩環相互重疊。
6.將目鏡重新安上,用細調節旋鈕將圖像調節清晰并觀察。
7.按同樣的方法分別用40倍物鏡和油鏡觀察,同時要將環形光
闌也調至相應位置。記錄觀察結果。
8.按照相同的步驟在40倍物鏡下觀察釀酒酵母。