酶復合物-大多數酶促反應都會因時間的延長
酶促反應初期,被轉化的底物量與正在進行的反應時間成正比。在
反應開始的第一階段后,反應速率開始下降,不再與時間成正比,這可
能是酶的自身失活,或因熱對酶的三級結構的效應,或是由于產物或副
產物對酶的抑制的結果。研究酶促反應初期反應速度與反應時間成線性
關系相變化的一段時間甚為重要,這段時間可短至一分鐘或長至幾天。
但大多數酶促反應都會因時間的延長,隨著反應產物的增加,逆向反應
逐漸增強,反應速度也隨之減慢。
一般化學反應隨反應產物的逐漸增多,底物明顯減少,反應速度下
降。酶促反應中的產物抑制,是指產物在釋出之前也和酶以復合體(EP)
的形式存在,即產物也可占領酶分子上的特殊位點,使酶不易與底物結
合或不易發揮作用。在雙底物雙產物反應中,產物還可和催化過程中生
成的不同形式的酶分子結合,或者和酶。底物復合體結合,形成不能轉
變為產物的“死端”產物(如在乳酸脫氫反應中,產物丙酮酸可形成酶
.NADH.丙酮酸復合物,也可形成丙酮酸.NAD+.酶復合物,這些都不
是反應中的天然中間復合體,對反應也有抑制作用);反應液pH也可能
發生改變,導致酶促反應偏離較佳條件。故線性反應期后,反應速度呈
現“非線性關系”,必須避免在非線性反應期內作速率監測,否則可引
起較大誤差。