配備相差顯微鏡高倍鏡觀察濃縮微生物數量樣品
制備濕片
實際上,釀酒師沒有時間從樣品中分離微生物后再進行觀察,
如果配備一臺相差顯微鏡,樣品制成濕片后很容易觀察。一般來說
,顯微鏡能看清微生物的較低數量要求為104次方個/mL,因此,
應該調整顯微鏡的視野和/或濃縮樣品,使微生物數量達到要求。
1.用接種環或者滴管,取一滴葡萄汁或葡萄酒于潔凈的載玻
片上。如果果汁或酒中的微生物數量比較低,可以采用不斷離心的
方法進行濃縮。離心時,用錐形離心管取10mL樣品,3000×g離心1
5min,離心后傾去上清液,玻棒攪勻沉淀物,然后用巴斯德滴管吸
取一滴沉淀物放置在玻片上。
2.放一個蓋玻片在吸取的液體上,做成濕片,然后分別用低
倍鏡和高倍鏡觀察。短期內保存,可以用凡士林封住蓋玻片四周,
防止濕片干燥。12.6制備霉菌的玻片培養物
霉菌的鑒定主要依賴于形態學特征,霉菌的生長培養基對其形
態具有非常大的影響。如果霉菌生長雜亂無章,顯微鏡觀察起來也
很困難。制備濕片,對細菌和酵母菌來說意義不大,但對于霉菌,
它則是一個典型的培養方法,制作過程如下。濕片的優點在于染色
后對微生物的機械損傷較小。
1.將A、B液等體積混合,配制乳酚一苯胺藍染料:
a.A液:將lOg苯酚與lOmL蒸餾水緩慢混合,完全溶解后,加
入10mL乳酸和10mL甘油;
b.B液:配制苯胺藍飽和溶液,取10mL染料,加入10mL甘油和
80mL蒸餾水。