微生物學技術檢測相差顯微鏡觀察試驗儀器
細胞生長曲線
當細胞接種于培養瓶后,它們便進入2~24小時的遲緩期,隨
后進入對數生長期(稱之對數期)較后細胞匯合成單層細胞,細
胞生長減少或不生長即為平衡期。這些時期對于每個細
胞系都有其特性,而且可以得到重復性好的測量數據——遲緩期
時間長短,對數期二倍增長時間以及平衡期飽和密度,決定于環
境條件是否能保持穩定。
生長周期的測定對于設計常規傳代以及實驗方案都是重要
的。每個時期中的細胞行為以及生物化學特性都發生有意義的變
化。因此,當在細胞中加入藥物或試劑以及收獲細胞時,控制細
胞
生長周期是十分重要的。從細胞生長曲線的形狀,也可獲得培養
物繁殖潛力的信息,但通常認為分析克隆生長是比較容易
而且較少含混不清或誤解。對于污染經常性的檢查是觀察培養液
pH的改變(一般pH下降,但有些霉菌污染時則pH值升高),培養液有
無云霧狀物,在顯微鏡下有無細胞外顆粒狀物質或在培養液中有沒
有來路不明的漂浮物。如果已經查明發生污染,丟棄的瓶子不能打
開,應立即高壓滅菌。
如果懷疑污染,要移出樣品,用相差顯微鏡觀察,革蘭氏染色
或用標準微生物學技術檢查。
支原體的污染:培養物可由培養液中血清、胰蛋白酶或操作本
身感染支原體。支原體感染肉眼觀察不到,但影響細胞的生長。它
們存在細胞通常是不明顯的,故應間隔一定的時間(每隔1~3月)檢
查培養物中的支原體是很重要的,因為他們能嚴重地影響細胞的生
物化學、抗元性以及生長特性。曾經推薦過多種檢查實驗,但較廣
泛使用的是Chen的DNA熒光染色技術。